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Meta扩增子测序
Meta扩增子测序的生信分析首先对测序原始数据进行拼接、过滤、质控,得到有效数据。然后基于有效数据进行OTUs(Operational Taxonomic Units )聚类和物种分类分析。根据OTUs聚类结果,一方面对每个OTU的代表序列做物种注释,得到对应的物种信息和基于物种的丰度分布情况。同时,对OTUs进行丰度、Alpha多样性计算等分析,以得到样本内物种丰富度和均匀度信息、不同样本或分组间的共有和特有OTUs信息等。另一方面,可以对OTUs进行不同样本或组别间群落结构差异的探究。同时,也可结合环境因素进行多样性指数与环境因子的相关性分析,得到显著影响组间群落变化的环境影响因子。
物种丰度柱形图
根据物种注释结果,选取每个样品在各分类水平(Phylum、Class、Order、Family、Genus)上最大丰度排名前10的物种,生成物种相对丰度柱形累加图,以便直观查看各样品在不同分类水平上,相对丰度较高的物种及其比例。
物种丰度柱形图
物种丰度聚类热图
根据所有样品在属水平的物种注释及丰度信息,选取丰度排名前35的属,根据其在每个样品中的丰度信息,从物种和样品两个层面进行聚类,绘制成热图,便于发现哪些物种在哪些样品中聚集较多或含量较低。
物种丰度聚类热图
主成分分析
主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)是一种应用方差分解方法,对多维数据进行降维,从而提取出数据中最主要的元素和结构。应用PCA分析,能够提取出最大程度反映样品间差异的两个坐标轴,从而将多维数据的差异反映在二维坐标图上,进而揭示复杂数据背景下的简单规律。如果样品的群落组成越相似,则它们在PCA图中的距离越接近。
主成分分析
LEfSe分析
LEfSe(LDA Effect Size)是一种用于发现高维生物标识和揭示基因组特征的软件,用于寻找组间差异显著的物种。包括基因,代谢和分类,用于区别两个或两个以上生物类群。该算法强调的是统计意义和生物相关性,让研究人员能够识别不同丰度的特征以及相关联的类别,以寻找具有统计学差异的Biomarker。
LEfSe分析
组间物种差异分析
针对有分组的项目,可以通过群落结构差异统计分析进行深入研究,为了寻找各分类水平(Phylum、Class、Order、Family、Genus、Species)下,组间的差异物种,做组间的T-test检验,找出差异显著(p值<0.05)的物种。
组间物种差异分析
广科安德可提供单细胞/空间组、基因组、表观组、微生物组、蛋白质组等多组学测序和生物信息学分析服务,从基础研究、转化研究到临床应用提供全方位科研技术服务及解决方案欢迎免费咨询,了解更多详细信息!我们的技术专员可免费为您提供业务评估。
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